中医杂志

2019, v.60(15) 1330-1335

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养阴解毒方对肺癌A549细胞增殖、凋亡及H3K27Me3修饰变化的影响
Effects of Yangyin Jiedu Decoction (养阴解毒方) on Proliferation,Apoptosis and H3K27Me3 Modification of Lung Cancer A549 Cells

杨文笑;焦丽静;姚嘉麟;赵小东;许玲;

摘要(Abstract):

目的探讨养阴解毒方治疗肺癌的可能作用机制。方法将A549细胞分别加入梯度浓度为0、62. 5、125、250、500、1000μg/ml的养阴解毒方,分别于24、48、72 h检测不同浓度的养阴解毒方对肺癌细胞系A549增殖能力的影响,依据细胞存活率计算最佳半数抑制浓度(IC_(50))。将A549细胞分为对照组及中药低、高剂量组。对照组为未加入养阴解毒方的培养基,中药高剂量组加IC_(50)浓度的养阴解毒方干预48 h,中药低剂量组加1/2 IC_(50)浓度的养阴解毒方干预48 h。检测各组细胞周期、细胞凋亡情况; ChIP-Seq技术分析IC_(50)浓度的养阴解毒方干预A549细胞48 h后H3K27Me3全基因组修饰变化,并进行GO功能富集分析。结果养阴解毒方可以明显抑制肺癌细胞A549的增殖,并呈剂量、时间依赖性(P <0. 05),其48 h时IC_(50)为63μg/ml。中药低、高剂量组均可将A549细胞阻滞在G2/M期,诱导细胞凋亡,且中药高剂量组阻滞效果及诱导晚期凋亡和总凋亡优于中药低剂量组(P <0. 05); ChIP-Seq结果显示,共有1058个基因H3K27Me3修饰程度发生改变,其中修饰程度增加的有601个基因,修饰程度降低的有457个基因。GO分析结果显示,上调基因与G蛋白偶联受体信号通路、凋亡过程的负调节等生物学功能有关,下调基因与RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调节、神经系统发育等生物功能有关。结论 63μg/ml养阴解毒方可以明显抑制A549细胞增殖,使细胞阻滞在G2/M期,诱导细胞凋亡,其机制可能与改变H3K27Me3表观遗传修饰谱有关。

关键词(KeyWords): 肺癌;养阴解毒方;细胞增殖;细胞凋亡;H3K27Me3;表观遗传学

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(81704035);; 中华中医药学会(2017-2019年度)青年人才托举工程项目(CACM-2017-QNRC2-C15);; 上海市科学技术委员会科研计划(16401970700);; 上海市卫生和计划生育委员会中医药科技创新项目(ZYKC201601020);; 上海市促进市级医院临床技能与临床创新能力三年行动计划(16CR1036B)

作者(Author): 杨文笑;焦丽静;姚嘉麟;赵小东;许玲;

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